組織/細(xì)胞/毛發(fā)微量基因組提取試劑盒是一種可以快速?gòu)慕M織、小鼠尾部、單根毛發(fā)、細(xì)胞培養(yǎng)液、唾液、精液等

動(dòng)物組織中提取微量基因組DNA并通過PCR擴(kuò)增進(jìn)行檢測(cè)的試劑盒。使用該試劑盒可以在12min內(nèi)完成基因組提取，

整個(gè)操作過程不需要離心、有機(jī)溶劑等復(fù)雜抽提步驟。提取的基因組可以直接用于PCR擴(kuò)增、定量分析等實(shí)驗(yàn)。

提取的基因組置于4℃至少保存3個(gè)月，可用于50-100個(gè)PCR反應(yīng)。

組分

組分名稱數(shù)量

Tissue-A Buffer1.25mlx2/25ml

Tissue-B Buffer1.25mlx2/25ml

2xSuper Taq PCR Mix (with dye)1 ml/1 mlx10

與離心柱型提取試劑盒比較

 微量提取型離心柱型

樣品量<5 mg10-100 mg

時(shí)間12min50分鐘左右

離心無需需要離心

酚/氯仿無需無需

純度未經(jīng)純化純度高，無污染

應(yīng)用PCR診斷PCR、酶切、Sourthern雜交等

主要特征

操作簡(jiǎn)單：應(yīng)用該試劑盒無需離心、酚抽提等復(fù)雜步驟，且整個(gè)流程只需12min。

高靈敏度：可用于提取微量樣品的基因組，且可直接用于PCR擴(kuò)增。

應(yīng)用廣泛：可從多種動(dòng)物組織中提取基因組應(yīng)用于各種相關(guān)PCR分析。

儲(chǔ)存

若短期使用請(qǐng)置于4℃可放置3個(gè)月；若長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-20℃，避免反復(fù)凍融，可保存一年。

 組織/細(xì)胞/毛發(fā)微量基因組提取試劑盒恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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